8.9.1. Мешотчатый расплод

Мешотчатый расплод (лат. Sacculisatio contagiosa larvae) — сухой гнилец, безбактериальный гнилец, сухая гибель червы, мешотчатая черва.

Мешотчатый расплод — вирусная болезнь личинок и куколок медоносных пчел.

Историческая справка, распространение, экономический ущерб. Одним из первых сообщений об этом заболевании, вероятно, является работа Лангстрота (1857), который выделил его под названием «сухой гнилец». В последующем болезнь отмечали во многих странах, наиболее детальные исследования проведены Г.Ф. Уайтом (1913, 1917), который установил этиологию, подробно описал признаки и дал утвердившееся название заболеванию. На территории СССР мешотчатый расплод установлен в 1917 г. К.А. Горбачевым.

Мешотчатый расплод наносит значительный ущерб пчеловодству, так как больные семьи без оказания помощи не дают товарного меда, не обеспечивают себя кормом, хозяйства лишаются возможности продавать маток и пакеты пчел. Особенно серьезные потери расплода в семьях пчел отмечены в Австралии.

Возбудитель болезни. Возбудитель — мелкий (30 нм) РНК- содержащий вирус Flaviridae, сем. Flaviridae. Штаммы вируса серологически идентичны. Вирус культивируется в первичных культурах ткани медоносных пчел и некоторых видов животных. Заражение культур вызывает вначале усиление митотической активности клеток, а через 72 часа появляются первые признаки ЦПД. Перевиваемые линии клеток позвоночных невосприимчивы к заражению.

Вирус устойчив к высушиванию, действию эфира и хлороформа.

В водной суспензии инактивируется при 59°С в течение 10 мин., на прямом солнечном свету — через 4-7 часов; в меде при 70-73°С — в течение 10 мин., в высушенном состоянии — 3 недели. Вирус погибает при кипячении через 40 мин., инактивируется в 0,3% марганцовокислом калии. Он сохраняется в меде при комнатной температуре около 1 месяца, в холодильнике — 2 месяца, в гнилостной массе — более 10 дней. На деревянных поверхностях, покрытых прополисом, вирус сохраняется 10-15 суток, на металлических — 5-10; на восковых сотах — 80-90 суток. Вирус устойчив к 3% едкой щелочи, 0,3-10% растворам риванола.

Эпизоотологические данные. Заболевание регистрируется повсеместно. Штаммы вируса серологически неидентичны. Местные
пчелы более устойчивы по сравнению с завозными. В естественных и экспериментальных условиях заражаются личинки рабочих пчел, маток и трутней всех возрастов, независимо от породы. Однако наиболее восприимчивыми к заражению являются личинки 2-3-дневного возраста, которые обычно погибают на 5-7-й день. Инкубационный период длится 5-6 дней. Одна больная предкуколка способна заразить 3000 здоровых личинок. Летальная доза для одной личинки составляет 105 и более вирусных частиц. Вирус выявляется через 18-48 часов после заражения в клетках жирового тела, эпителии трахей, средней кишке, мышцах и нервной ткани предкуколки. Возбудитель может развиваться в организме взрослых пчел, однако признаков поражения у них не вызывает.
Заражение личинок осуществляется через взрослых пчел.

Молодые взрослые насекомые заражаются при очистке ячеек сотов от погибших личинок. Заражение последних происходит через слюну взрослых пчел, в организме которых возбудитель сохраняется в течение зимы. Пчелы старше 8 дней невосприимчивы к вирусу мешотчатого расплода.

В настоящее время с помощью метода молекулярно-генетического анализа установлено, что вертикальный путь передачи вируса (зараженной маткой через яйцо) является основным, а горизонтальный (через корм и т.д.) — побочным. Причем концентрация вируса в яичниках невелика, поэтому он не влияет отрицательно на яйца. И только при неблагоприятных условиях для пчелиных семей (отсутствие корма, ветреная сухая погода, неожиданное снижение численности внутриульевых или полевых пчел) болезнь начинает проявляться.

Клещи варроа способны переносить вирус от сильно инфицированных куколок к здоровым и способствуют распространению возбудителя внутри сильно пораженной мешотчатым расплодом семьи пчел, ускоряя ее гибель. Куколки и возникшие из них взрослые пчелы могут приобретать также инаппарентную инфекцию, если личинки получали инфицированный вирусом корм от имаго.

Заболевание пчел чаще регистрируется весной и в первой половине лета (май-июнь) после продолжительной холодной погоды, при недостатке перги и меда в семьях. Сильные семьи поражаются в меньшей степени, чем слабые и средние. С наступлением медосбора признаки заболевания исчезают. Однако они вновь могут появиться осенью или весной следующего года. Внутри пасеки передача возбудителя заболевания происходит при перелетах рабочих пчел и трутней из больных семей в здоровые, перестановке сотов для выравнивания силы семей. Часть погибших личинок и куколок удаляется из сотов взрослыми
пчелами.

Возможность передачи возбудителя матками остается не ясной, хотя известно, что замена их в неблагополучных семьях часто приводит к выздоровлению семьи пчел.

Мешотчатый расплод часто протекает совместно с европейским гнильцом. Течение смешенного заболевания тяжелое; признаки, специфические для первой болезни, нечеткие. Часто смешанное течение принимают за европейский гнилец, однако после применения антибиотиков, подавляющих возбудителей европейского гнильца, в семьях отмечается обострение и поражение других семей мешотчатым расплодом.

Течение и клиническое проявление. Инкубационный период при скармливании минимальной дозы возбудителя личинкам составляет 7 дней, при инокуляции куколке — 5 дней. В пораженных семьях расплод на соте расположен неравномерно. Он имеет пестрый вид; крышечки на многих ячейках с печатным расплодом удалены или слегка запавшие, с одним-двумя отверстиями; внутри таких ячеек находят вытянутых мертвых личинок, лежащих на спине вдоль ячейки.

У недавно погибших предкуколок под кутикулой видны трахеи, головной конец слегка отходит от края ячейки. При осторожном выделении тело имеет вид мешка, заполненного зернистой мутно-белого цвета жидкостью. Образование большого пространства под кутикулой и накопление жидкости вызвано распадом жировых клеток. В последующем происходит потемнение головного конца, сегментация сглаживается, объем жидкости увеличивается, она становится коричневого цвета. При этом упругость утрачивается, но сохраняется форма тела; твердая кутикула заполнена коричневой зернистой массой. В дальнейшем тело становится бесформенным, а содержимое — клейким, предкуколки приобретают темно-коричневый или черный цвет, высыхают и выглядят в виде легко выделяющихся полулунных корочек, лежащих выпуклой (спинной) стороной на стенке ячейки. Гибель расплода постепенно нарастает, гибнет до 10% личинок маток. Инфицированные молодые взрослые пчелы изменяют поведение: не приближаются к личинкам, прекращают их кормление, начинают раньше участвовать в медосборе, но плохо собирают пыльцу. Может погибнуть часть семей. В других семьях с приносом нектара в улей признаки поражения исчезают.

Приблизительно в 10% случаев заболевание может протекать бессимптомно.

У пораженных личинок изменяется окраска тела, появляются волоски и шипики, наступает преждевременная скперотизация, т.е. возникает промежуточная форма с признаками доимагинального и взрослого насекомого. При электронной микроскопии в инфицированных вирусом клетках гипофаренгиальных желез, эпителии кишечника куколок отмечено три типа цитоплазматических включений. Везикулярные структуры состоят из электронно-плотного аморфного материала, окруженного скоплениями мембранозных пузырьков диаметром 100-800 нм. В пузырьках видны тонкие переплетенные волокна, пузырек заполнен целыми и пустыми вирусными частицами, последние также аккумулируются в ядрах инфицированных клеток.

Вирусные тела-включения окружены двухслойной мембраной диаметром от 200 нм до 1 мкм и больше. Содержат внутри тонко гранулированный электронно-плотный материал, окружены вирусными частицами, разбросанные вирионы встречаются внутри цитоплазматических включений. Предполагается, что оба типа цитоплазматических включений связаны со сборкой вирионов.

Третий тип включений представлен группами скрученных двойных миэлиноподобных мембран.

Диагностика, дифференциальная диагностика. Диагноз заболевания устанавливают на основании характерных признаков и последующего лабораторного исследования патологического материала (часть сота с 20 или более пораженными личинками и куколками или такое же количество выделенных измененных личинок в 50% глицерине).

Из методов лабораторной диагностики используют РИД, прямой и непрямой РИФ. Возможно использование также реакции коагглютинации (РКОА) в соответствии с утвержденной нормативной документацией и ПЦР.

Мешотчатый расплод необходимо дифференцировать от других болезней расплода.

[b]Иммунитет, специфическая профилактика.] Иммунитет изучен недостаточно. Попытки иммунизировать пчел, скармливая им инактивированный вирус, результатов не дали. Определенный эффект отмечен при применении гипериммунной сыворотки, полученной от кроликов или лошадей.

Меры борьбы. Больные семьи сокращают и утепляют, удаляют соты с пораженным расплодом и кормом, семьи обеспечивают достаточным количеством белкового и углеводного корма; меняют маток или прерывают яйцекладку матки, заключив ее на 5-7 дней в клеточку.

При сильном поражении делают перегон в чистый продезинфицированный улей на вощину при наличии поддерживающего медосбора, если пчел подкармливают жидким сахарным сиропом. Мед и пергу от больных семей нельзя использовать для подкормки
пчел. На пасеку накладывают ограничения.

Лечение. В качестве лечебного и профилактического средства могут быть использованы эндоглюкин (эндонуклеаза бактериальная) и рибонуклеаза. Однако их эффективность очень низкая.

В экспериментальных условиях хороший результат получен при скармливании пораженным семьям сахарного сиропа с 0,5% раствором марганцовокислого калия. Это приводило их к оздоровлению.

Соты дезинфицируют концентрированной муравьиной кислотой.

Пчеловодный инвентарь после тщательной механической очистки прожигают или обрабатывают муравьиной кислотой, промывают водой и сушат; халаты, холстики, полотенца кипятят в растворе кальцинированной соды, прополаскивают в воде и сушат. Дезинфекция воска достигается перетапливанием его в водяной бане при 70°С в течение 70 мин. или автоклавированием (111 °C) при 0,5 атм в течение 30 мин. Возможна дезинфекция газом, бромистым метилом под пленкой при экспозиции 10 суток.

Пересадка инфицированного гнезда пчел в продезинфицированный улей на чистые соты без подавления развития возбудителя в организме насекомых эффекта не дает. Ограничения снимают после ликвидации болезни.