Историческая справка, степень опасности, ущерб. Одни из первых публикаций о болезни и возбудителе были сделаны Маассеном. Немного позднее Прелем (1927) было дано подробное описание возбудителя, которое позволило ученому выделить его в самостоятельный вид. Болезнь отмечена во многих странах умеренного климата и южных широтах. Частота положительных диагнозов на амебиаз в Англии не превышает 2% случаев, в Италии - 0,2%, в нашей стране - 8-11%. Болезнь чаще всего регистрируют как осложнение нозематоза, значительно реже - как самостоятельное заболевание.
Наибольший экономический ущерб пчеловодству наносит смешанное течение нозематоза с амебиазом, часто заканчивающееся летальным исходом.
Возбудитель. Malpighamoeba mellifi - cae Prell (1927) вне организма пчелы сохраняется в форме цисты овальной или шарообразной формы размером 5-7 мкм. Циста покрыта гладкой, плотной, с трудом окрашивающейся оболочкой (рис. 111). Цитоплазма имеет ядро (1 мкм) с ядрышком крупных размеров, занимающим почти все ядро. Возбудитель поражает преимущественно взрослых пчел старшего возраста, очень редко маток и трутней.
Рис. 111 Возбудитель амёбиаза в мальпигиевых сосудах пчелы: 1 - цисты; 2 - вегетативные формы амеб. Цисты, попадая с кормом или водой в кишечник пчелы, переходят в вегетативную форму. Первично проникают в ворсинки эпителиальных клеток средней кишки, которые находятся на границе с протоками мальпигиевых сосудов. В этот период тело возбудителя (первичный трофозоит) длинное, тонкое с диаметром 3,8 мкм, с гладкой поверхностью и наличием пузырьков в цитоплазме. Вторичные трофозоиты, попавшие в мальпигиевые сосуды, представляют собой тельца разной конфигурации, состоящие из ядра и протоплазмы. Ядро сильно преломляет свет и обычно выделяется в виде белого пятна, а протоплазма обнаруживает ясную дифференциацию на экто и эндоплазму. Эктоплазма образует поверхностную мембрану амебы - плазмолемму. Эндоплазма имеет зернистую структуру с мелкими включениями. Передвигается возбудитель при помощи псевдоподий - ложноножек с остроконечной и кольцеобразной загнутостью. Они то исчезают, то появляются вновь, меняют форму, поэтому форма амебы все время видоизменяется.
В мальпигиевых сосудах амебы плотно присасываются к поверхностному слою эпителиальных клеток, проникают своими псевдоподиями в промежутки между эпителиальными клетками, извлекая из них необходимые питательные вещества путем фаго и эндоцитоза (см. рис.111).
Размножаются амебы путем деления, половых форм не образуют. Вегетативная форма активно размножается при 23-32 С в течение 3-4 нед., а затем образует цисты.
При неблагоприятных условиях развития, например при недостатке пищи, понижении температуры и других, амебы прекращают размножение и образуют стойкие цисты. Перед образованием цист ядро амебы приобретает плотную структуру. Протоплазма, освобождаясь от избытка воды, концентрируется и покрывается оболочкой. Цисты выходят из пчелы с испражнениями и попадают на соты, растения, воду и др.
В форме цисты амеба может долго сохраняться при неблагоприятных условиях внешней среды. Особенно хорошо цисты переносят высушивание. В сухих пятнах фекалий на сотах цисты сохраняются 5-6 мес.
Эпизоотологические данные. Амёбиаз распространяется в умеренных широтах Европы (кроме Норвегии и Испании), в Азии, Северной Америке, на юге Южной Америки, в Африке, Новой Зеландии. Не регистрируется в субтропиках и тропиках. В нашей стране регистрируют как в европейской части, так и в зонах Западной Сибири и Дальнего Востока. Принято считать, что амёбиаз протекает как вторичная инвазия нозематоза. Однако в конце 1940-х гг. в Приморском крае, Австрии, Швейцарии, США были зарегистрированы случаи амёбиаза без нозематоза.
В настоящее время в Рязанской, Московской, Тверской областях, Алтайском, Хабаровском краях также зарегистрирован амёбиаз без нозематоза. Во всех семьях, пораженных амёбиазом, регистрировали наличие варрооза свыше 10%.
К амёбиазу восприимчивы взрослые пчелы. Весной легко удается искусственно заразить пчел при скармливании испражнений с цистами больных пчел. Попытки заразить пчел в летний период часто заканчивались неудачей. Переболевшие амёбиазом пчелиные семьи могут повторно заболеть весной следующего года. Источником инвазии являются больные пчелы. Из мальпигиевых сосудов больной пчелы цисты амебы выделяются вместе с экскретами в тонкую кишку, а затем с испражнениями во внешнюю среду, загрязняя корма, гнездовые соты, поилки. В последующем через загрязненные корма, предметы и воду заражаются здоровые пчелы.
Предрасполагающими факторами для появления амёбиаза служат холодная весна и скудные запасы корма. В этом случае затрудняется обогрев и кормление расплода, в результате чего сокращается его количество. Замена перезимовавших пчел на молодых осложняется, а недостаток или наличие в гнезде недоброкачественных кормов усугубляет и без того критическую ситуацию. Если при низких температурах пчелы затрачивают почти все свои силы на сохранение расплода, то в ослабленном организме пчел амебы начинают очень интенсивно размножаться.
Патогенез. Амебы, попав в организм пчелы, быстро размножаются в мальпигиевых сосудах, разрушая межклеточное пространство и сами эпителиальные клетки. Они заполняют просветы мальпигиевых сосудов. Закупорка препятствует отделению и выводу уратов. Их накопление в организме вызывает сначала ряд местных и общих функциональных расстройств, а затем отравление организма пчел продуктами жизнедеятельности. Иногда скопление амеб может вызвать механическую закупорку мальпигиевых сосудов и привести к их разрыву. Это чаще всего происходит в полете, так как в полете усиливается интенсивность обменных процессов, а следовательно, и нагрузка на пораженные сосуды. Разрушение эпителиальных клеток способствует проникновению в организм пчелы патогенных микробов. Окаймление эпителия в пораженных мальпигиевых сосудах частично отсутствует, эпителиальные клетки делаются плоскими, мальпигиевы сосуды расширенными.
Клинические признаки. В европейской части России с середины апреля, в Сибири, на Дальнем Востоке - с середины мая при неблагоприятных условиях пчеловоды обнаруживают постепенное уменьшение массы пчел в семьях. Пчелы погибают в полете, вне улья, поэтому истинные причины гибели остаются неясными. С повышением количества больных пчел, особенно после похолоданий, на пасеке можно обнаружить ползающих пчел с увеличенным брюшком, в гнезде пятна поноса на сотах и стенках улья. Испражнения водянисто-жидкие, зловонные и часто желтые, как сера. Перед ульем лежат мертвые пчелы. При вскрытии брюшной полости пчелы отмечают стекловидные мальпигиевы сосуды молочно-белого цвета. Они часто увеличены.
При смешанном поражении пчелиных семей амёбиазом и нозематозом пчелы быстрее слабеют, утрачивают работоспособность и погибают.
В ветеринарную лабораторию направляют 50-100 мертвых или 20-30 живых ползающих пчел с увеличенным брюшком.
Диагноз. Постановка диагноза складывается из эпизоотических данных, клинических признаков и лабораторных исследований.
Прижизненная диагностика основана на микроскопировании мазков, приготовленных из мальпигиевых сосудов. Для этой цели извлекают кишечную трубку из тела пчелы на предметное стекло, наносят каплю воды, отделяют от кишечной трубки мальпигиевые сосуды и рассматривают их при малом увеличении. Пораженные мальпигиевые сосуды стекловидные, молочно-белого цвета, несколько увеличены. Их растирают стеклянной палочкой на предметном стекле, накрывают покровным стеклом и просматривают. В поле зрения микроскопа (объектив х40) обнаруживают круглые или овальные цисты амеб.
При наличии мертвых пчел отделяют до 50 брюшек сухих пчел и переносят в ступку, добавляют 15 мл воды и пестиком перетирают содержимое до образования суспензии, а затем микроскопируют каплю суспензии, накрытой покровным стеклом, на наличие цист амёб. Диагноз считается установленным, если в поле зрения микроскопа обнаруживают от 20 и больше цист амеб.
Цисты амеб следует отличать от капель жира, дрожжевых клеток, спор плесневых грибов. Дифференцируют от нозематоза и энтеробактериальной инфекции пчел.
Профилактика и меры борьбы как при нозематозе пчел.
